簡介
需要的其他材料
樣品保存
樣品收集后若在 1 周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融,標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從40ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至2000pg/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的2000pg/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將2000pg/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 2000pg/mL、 1000pg/mL、 500pg/mL、 250pg/mL、 125pg/mL、 62.5pg/mL、 31.25pg/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0pg/mL)。

使用前10分鐘,將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液,根據(jù)所需用量當日配置當日使用。
使用前10分鐘,將100×SA-HRP溶液于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×SA-HRP稀釋成1×SA-HRP工作液,根據(jù)所需用量配置。
結(jié)果的計算
示例數(shù)據(jù)
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
標準品濃度(ng/mL)
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.313
0
OD值
2.594
1.652
1.061
0.652
0.454
0.225
0.161
0.064
校正OD值
2.530
1.588
0.997
0.588
0.39
0.161
0.097
0
下圖所示標準曲線僅供示例,結(jié)果計算應(yīng)以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結(jié)果
重復(fù)性
靈敏度
特異性
使用ELISA試劑盒之前,請您必須完整閱讀說明書,本產(chǎn)品僅供科研使用,不能于臨床診斷或治療。