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  • 免疫熒光四標五色染色

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免疫熒光四標五色即利用抗原抗體特異性結合原理,在同一張切片上顯示四種目標蛋白的分布和共定位情況。

原理介紹: 酪酰胺信號放大(TSA,Tyramide signal amplification)技術是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白進行標記的酶學檢測方法,類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法 ,TSA技術同樣采用HRP標記的二抗,同樣有對應的“顯色”步驟(HRP催化加入反應體系的酪胺熒光素底物,產生活化熒光底物,活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結合,使樣品上穩(wěn)定的共價結合酪胺熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結合的一抗-二抗-HRP復合物,重復下一種一抗-hrp二抗來第二輪孵育,換另一種酪胺熒光素底物,如此往復就可實現多重標記。